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大豆異黃酮檢測|茁彩生物

發(fā)布時間: 2025-06-30  點擊次數(shù): 611次

大豆異黃酮是黃酮類化合物的一種,屬于大豆生長過程中形成的一類次生代謝物,也是大豆的主要活性成分之一。目前研究發(fā)現(xiàn),該物質(zhì)具有弱雌性激素活性、抗氧化活性、抗溶血活性和抗真菌活性,因其結(jié)構(gòu)與雌激素相似,故又被稱為“植物雌激素"。它不僅可以作為雌性激素的替代品來改善婦女更年期綜合癥,還能有效預(yù)防并抑制白血病、骨質(zhì)增生、結(jié)腸癌、肺癌、胃癌、乳腺癌和前列腺癌等多種疾病。異黃酮在自然界中的分布較為有限,僅存在于豆科的碟形花亞科等少數(shù)植物中,而在大豆中的含量相對較高。因此,深入研究大豆異黃酮的含量變化規(guī)律及其藥用機理,對于提高大豆的綜合利用價值以及研發(fā)新型抗癌藥物具有至關(guān)重要的意義。

大豆異黃酮主要以糖苷型和游離型兩種形式存在于大豆中。在新鮮大豆里,大部分異黃酮與葡萄糖結(jié)合形成糖苷型,這類異黃酮水溶性較好,但生物活性相對較低;當大豆經(jīng)過加工,如發(fā)酵制成豆豉、納豆時,糖苷鍵被水解,釋放出游離型異黃酮,其生物活性顯著增強 。

從化學結(jié)構(gòu)來看,大豆異黃酮具有與人體內(nèi)雌激素 —— 雌二醇相似的結(jié)構(gòu),這使得它能夠與人體細胞內(nèi)的雌激素受體結(jié)合,發(fā)揮類似雌激素的作用,但活性僅為雌二醇的千分之一到萬分之一 。主要成分包括染料木素、大豆苷元和黃豆黃素。



大豆異黃酮苷,為大豆苷、大豆黃苷、染料木苷的統(tǒng)稱。

大豆異黃酮苷元,是大豆素、大豆黃素以及染料木素三種苷元的統(tǒng)稱。

大豆皂苷,是大豆生長過程中形成的另一類次生代謝產(chǎn)物,往往存在于大豆異黃酮產(chǎn)品中。它是由糖中的羥基與齊墩果稀縮合而形成的一類結(jié)構(gòu)復雜的天然皂苷化合物。

測定方法

高效液相色譜法:(GB/T 26625-2011 糧油檢驗 大豆異黃酮含量測定)

取有代表性的樣品若干,用粉碎機粉碎,使其全部通過孔徑2.0 mm的樣品篩,混勻后裝入潔凈容器作為試樣,密封備用(粉碎試樣需在4℃以下保存。試樣制備過程中,應(yīng)防止樣品污染或組分變化)。

稱取5 g(精確到0.01 g)試樣于250 mL具塞三角瓶中,加入90 mL 90%甲醇溶液,置于超聲波清洗器中,在60℃下提取30 min,然后以10000 r/min的速度離心10 min。將上清液轉(zhuǎn)移至250 mL濃縮瓶中,殘渣再加入60 mL 90%甲醇溶液進行二次提取,上清液同樣轉(zhuǎn)入濃縮瓶。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中,于60℃下將混合液濃縮至約40 mL,再將濃縮液轉(zhuǎn)入50 mL容量瓶,用10%甲醇溶液沖洗濃縮瓶并定容至刻度。取1 mL提取液通過0.45 μm濾膜,供高效液相色譜儀測定。

分光光度法:準確稱取一定量的大豆全豆粉,加入20倍體積的一定濃度乙醇,經(jīng)超聲處理后離心,取上清液,用濾膜過濾,重復抽提2次,合并濾液。將濾液用一定濃度乙醇稀釋至適當倍數(shù),使用酶標儀測定其在240 nm、260 nm和280 nm波長處的吸光值,根據(jù)標準曲線計算樣品的異黃酮含量。


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